解析人蛋白ELISA試劑盒的檢測原理和性能特點(diǎn)

　　人蛋白ELISA試劑盒供科研使用，定量檢測血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞裂解液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液等相關(guān)樣本中人白蛋白(ALB)的濃度。
 

　　人蛋白ELISA試劑盒的檢測原理：
 

　　應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中人白蛋白(ALB)水平。用純化的人白蛋白(ALB)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入人白蛋白(ALB)，再與HRP標(biāo)記的人白蛋白(ALB)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人白蛋白(ALB)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值)，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人白蛋白(ALB)濃度。
 

　　人蛋白ELISA試劑盒的性能特點(diǎn)：
 

　　1、物理性能
 

　　試劑盒的各液體組分應(yīng)澄清透明、無沉淀或者絮狀物。微孔板鋁箔袋應(yīng)真空包裝，無破損漏氣(如有漏氣，不影響使用)。
 

　　2、劑量反應(yīng)曲線線性
 

　　標(biāo)準(zhǔn)品劑量反應(yīng)曲線相關(guān)系數(shù)r值，大于等于0.9900。
 

　　3、回收率
 

　　分別往5個(gè)不同樣本中添加已知濃度的目標(biāo)蛋白，做回收實(shí)驗(yàn)，得出回收率范圍和平均回收率。
 

　　4、線性
 

　　分別往5個(gè)樣本中添加已知濃度的目標(biāo)蛋白，做回收實(shí)驗(yàn)，得出回收率范圍及平均回收率。將5個(gè)樣本分別稀釋2倍，4倍，8倍，16倍做回收實(shí)驗(yàn)，得出回收率范圍及平均回收率。