淺談人鈣黏素ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)原理和注意事項(xiàng)

　　人鈣黏素ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)原理：
 

　　該試劑盒使用雙抗體夾心法測(cè)定樣本中的人鈣粘蛋白1(PCDH1)水平。用純化的人鈣粘蛋白1(PCDH1)抗體包被微孔板制備固相抗體。依次將原鈣粘蛋白1(PCDH1)加入單克隆抗體包被的微孔板中，然后與HRP標(biāo)記的原鈣粘素1(PCDH1)抗體結(jié)合形成抗體-抗原-酶標(biāo)記的抗體復(fù)合物。*清洗后，添加基質(zhì)TMB以顯色。
 

　　TMB在HRPase的催化下轉(zhuǎn)化為藍(lán)色，在酸的作用下最終轉(zhuǎn)化為黃色。樣品中的顏色深度與PCDH1呈正相關(guān)。使用微孔板閱讀器測(cè)量450nm波長(zhǎng)處的吸光度(OD值)，并通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中PCDH1的含量。
 

　　人鈣黏素ELISA試劑盒的使用注意事項(xiàng)：
 

　　1、試劑盒應(yīng)在取出冷藏環(huán)境并在室溫下平衡15-30分鐘后使用。如果酶標(biāo)簽的涂層板在啟封后沒(méi)有用完，則應(yīng)將該條儲(chǔ)存在密封袋中。
 

　　2、濃縮洗滌液可能結(jié)晶，稀釋時(shí)可在水浴中加熱溶解，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
 

　　3、樣品添加的每個(gè)步驟都應(yīng)使用取樣器，并應(yīng)經(jīng)常檢查其精度，以避免試驗(yàn)誤差。每次采樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi)。如果樣本數(shù)量較大，建議使用噴槍進(jìn)行采樣。
 

　　4、請(qǐng)?jiān)诿看螠y(cè)量的同時(shí)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，最好制作多個(gè)孔。如果樣品中待測(cè)物質(zhì)的含量過(guò)高，請(qǐng)?jiān)跍y(cè)量前用樣品稀釋劑稀釋一定次數(shù)(n次)，然后在計(jì)算時(shí)乘以總稀釋比(×n×5)。
 

　　5、密封膜只能使用一次，以避免交叉污染。
 

　　6、使基板遠(yuǎn)離光線(xiàn)。
 

　　7、嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，測(cè)試結(jié)果必須根據(jù)微板閱讀器讀數(shù)確定。
 

　　8、所有樣品、洗滌液和各種廢物應(yīng)作為傳染性物質(zhì)處理。